脓毒症模型

脓毒症模型方法及原理

一般构建脓毒症模型有多种方式，例如细菌攻击、内毒su攻击、腹膜炎攻击等，针对小鼠较为经典的方法为盲肠jie扎穿刺（CLP）。此方法属于腹膜炎攻击方法的一种，主要是通过手术方式将小鼠自身盲肠内容物释放到腹腔造成gan染，从而模拟脓毒症的发生和发展。

实验方法

Step1：常规方法ma醉小鼠，剔除腹部毛发，酒精消毒

Step2：腹部正中开口，逐层打开皮肤和腹膜，暴露盲肠

Step3：使用锐器刺穿盲肠尾部1/2位置，挤出内容物

Step4：放置引流物，时盲肠内容物可持续流出

Step5：逐层缝合皮肤，碘伏消毒，将小鼠放回笼内饲养

实验动物的标记

1. 染色法　适用于小动物，如兔子、大鼠、小鼠等。此方法是将化学药品涂在动物的被毛上，以不同颜色来区分动物。常用的化学药品有：3%～5%溶液（黄色）、0.5%中性品红（红色）、2%（咖啡色）。

标记的原则是：先左后右，医学实验外包，从上到下。如果动物编号是二位数或三位数，那相应的用二种或三种不同的颜色，不同颜色代表不同位数（个位、十位、百位），标记的原则同上。

2. 挂牌法　常用于大动物。写有编号的金属牌挂在动物的颈上来区分动物。对于猴、狗、猫等动物有时可不做标记，只记录它们的外表特征和毛色即可。

3. 笼子编号　标记在笼子上。

以上只介绍了几种的方法，在使用中可灵活掌握。

睡眠剥夺模型

实验用金属箱直径35 cm， 每箱装1只大鼠。REMSD 各组分别置于直径为6.5 cm的小站台上，对照组大鼠置于直径15 cm的大站台上，周围是水环境，水深3 cm，平台在水面以上1 cm，于平台以上14 cm 处放笼罩，上面放水和食物。水温和室温保持在25 C，每日换水并打扫实验箱。REMSD 组大鼠在小台上屈曲而立，医学实验，在快动眼睡眠(rapid eye movement sleep， REMS) 时，医学实验外包选哪家，由于伴随全身肌肉松弛和节律性垂头，大鼠落入水中而惊醒，再爬上站台。用此方法自18:00开始连续剥夺大鼠的REMS至相应实验时间点。

 旷场实验( open field test， OFT )

实验装置为高60 cm、 底面边长100 cm、内壁涂黑的无盖方箱，底面平均分为25个小方格，正上方2 m处架一摄像机，镜头对准箱底，实验在安静环境下进行，大鼠置于方箱底面中心，同时进行摄像和计时，3 min 后停止摄像，更换动物后，继续进行实验。2次实验之间清洗箱壁及底面，以免上次动物余留的信息影响下次实验结果。计分方法:通过放像设备，观察大鼠3 min内越过的格子数为水平得分，后肢站立次数为垂直得分，两者之和为OFT总得分。REMSD实验前后均进行旷场实验。

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