病理实验外包，病理染色荧光原位杂交技术详细介绍1、原理

FISH(fluorescence in situhybridization)技术是一种重要的非性原位杂交技术。它的基本原理是:如果被检测的染色体或DNA纤维切片上的靶DNA与所用的核酸探针是同源互补的，二者经变性-退火-复性，即可形成靶DNA与核酸探针的杂交体。将核酸探针的某一种核苷酸标记上报告分子如生物素、，可利用该报告分子与荧光素标记的特异亲和素之间的**化学反应，经荧光检测体系在镜下对待测DNA进行定性、定量或相对定位分析。

2、实验流程

FISH样本的制备→探针的制备→探针标记→杂交→（染色体显带）→荧光显微镜检测→结果分析。

3、特点

原位杂交的探针按标记分子类型分为性标记和非性标记。用同位素标记的性探针优势在于对制备样品的要求不高，可以通过延长曝光时间加强信号强度，故较灵敏。缺点是探针不稳定、自显影时间长、线的散射使得空间分辨率不高、及同位素操作较繁琐等。南京英瀚斯，病理染色实验服务平台。

 病理实验外包，病理染色切片常见问题及解决方法：1.切片弯曲且不能形成直带

●原因：①蜡块上下或左右两边不平行。②蜡块与切片刀刀口不平行。③组织块外形不整齐。④切片刀各处的锋利程度不一致。

●解决方法：①将蜡块四边反复修平对称。②调节蜡块夹持器，使其与切片刀平行。③修整组织块时，注意修切整齐。④移动切片刀，更换刀口位置。2.切片上出现裂纹

●原因：①切片刀上有小缺口，或刀口不平整。②组织中可能含有较硬之物质，病理实验外包费用，如固定液之结晶石灰质。③包埋时石蜡冻结太慢。

●解决方法：①切片刀某处有缺口，可调换刀口部位或重新磨刀。刀口上缺口过多且不平整，宝鸡病理实验，可先将刀锋垂直在磨刀石上轻轻磨数次，然后按常规磨刀田。②组织中硬性物质太多，则不宜用。③纠正包埋时的缺点。一般待蜡块周围凝结一层，即可放入冷水中。南京英瀚斯，的病理染色实验服务平台。

【造模机制】以15％氯化钠配制的60％乙醇可以模拟高盐和乙醇对胃的刺激作用，并在用前加热至55℃可模拟高温食物对胃的刺激作用；脱氧胆酸钠可以模拟十二指肠液(内含胆汁)反流对胃的刺激作用。

【造模方法】Sprague Dawley大鼠，雄性，平均体重170g。脱氧胆酸钠需每次灌胃前新鲜配制，终浓度为20mmol/L。灌胃用60％乙醇是以15％氯化钠加无水乙醇配制而成，灌胃前恒温至55℃。实验周期共13周。实验～35天，大鼠自由饮用脱氧胆酸钠溶液，病理实验外包收费，同时每隔5天以60％乙醇灌胃(10ml/kg)一次，第36～91天，每3天交替饮用脱氧胆酸钠或15％乙醇，同时每隔7天以60％乙醇灌胃一次。造模期间，配合使用饥饱失常法，即：～56天，饱食2天，禁食1天；第57～91天，饱食2天，禁食禁水1天。13周后，模型组大鼠体重比对照组明显下降，胃黏膜厚度明显减小。大体病理可见胃黏膜皱襞变平甚至消失，黏膜血管暴露、黏膜呈颗粒或结节状，组织病理学实验外包，组织病理可见黏膜内炎性细胞聚集、腺体明显减少，排列不整，黏膜厚度明显减小。

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