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细胞培养的环境

无菌环境

无毒和无菌是体外培养细胞的首要条件。细胞在huo体内,jie毒系统和mian疫系统可抵抗微生物或其他有害物质的入qin,但细胞在体外培养的过程中,缺乏机体mian疫系统的保护而丧失对微生物的防御能力和对有害物质的能力。为保证细胞能在体外环境中生长繁殖,必须要确保无菌工作区域、良好的个人卫生、无菌试剂和培养基以及无菌操作。

常见的微生物污染有支原体、细菌、真菌。支原体无致死毒性,可与细胞长期共存,对细胞有潜在影响,但体积小,不易鉴别,可借助于地衣红或Hoechst33342染色来进行检测。细菌增殖快,整体实验外包,在短时间内即可大量扩增,并产生du素sha死细胞。真菌的种类繁多,肉眼可见,漂浮于培养液面上,可呈丝状、管状或树枝状等。

细胞培养的环境及条件

合适的温度

一般哺乳类与禽类细胞在体外培养的适宜温度是37~38,不适宜的环境温度会影响细胞的生长。细胞对低温的耐受能力要强于对高温的耐受能力,在低温下,实验外包服务,细胞的代谢活力及核分裂能力降低。若温度不低于0,虽然细胞代谢受到影响,但无损伤作用;25~35时,细胞以缓慢的速度生长;但若被置于40数小时,则不仅不利于细胞生存、生长,甚至可导致其si亡。

适宜的渗透压

高渗溶液或低渗溶液会引起细胞发生褶皱、肿胀、po裂。因此,渗透压是体外培养细胞的重要条件之一。多数体外培养的细胞对渗透压都有一定的耐受能力,实际应用中,260~320mmol/L的渗透压可适用于大多数细胞。

气体环境与pH

细胞的体外培养需要理想的气体环境,氧气、二氧化碳是细胞生存的必要条件。氧气参与细胞的三羧酸循环,为细胞生存、代谢与合成提供能量;二氧化碳既是细胞的代谢产物,是细胞生长的必需成分,南京实验外包,又与维持培养液的pH有关。大多数细胞适宜的pH范围往往是7.2~7.4。在开放式培养中,以5%的二氧化碳气体比例为宜。










动物实验动物性别的鉴定

1、大、小鼠的

离乳仔鼠主要以与之间的距离长短及与有无被毛为标志。识别要点是:①雄性的与之间的距离较远,雌鼠较近;②雄性的与之间有毛;③雄性的突起较雌鼠大;④雌鼠较雄鼠明显。成熟后,雄性可见,雌性明显而易于区分。

2、豚鼠的

豚鼠的主要是通过形态来判断。雌性外突起比较小,用拇指按住突起,余指拨开大的皱褶,可见口呈”V”形(注意发情间期的闭锁现象,即一种除了发情和分娩时外,关闭口的细胞结构);雄性外有覆盖的隆起,用拇指按住其基部,可见向外突出。

3、兔子的

幼兔的主要以开口部与之间的距离及开口部的形状来判别。哺乳期仔兔,雄性开口部与之间的距离较远,为雌性的1.5-2倍,雌性较近。雌性开口扁形,大小与同;雄性圆形,略小于。1月龄仔兔,雄性生殖孔呈圆形,翻出可见呈圆柱体的突起;雌性生殖孔呈Y形,翻出仅见有裂缝,裂缝及于。3月龄以上成年兔,雄性明显而雌性无;雄性头大短而圆而雌性头小略呈长形。

鸟类在第二性征如肉冠、羽毛、发声出现前,区分性别极为困难,但可以通过孵出时24小时内进行外翻泄殖腔鉴别。雄性中可观察到微小而能的孔突上有输精管开口,但此法不仅要有丰富的经验,而且准确性常难以。





动物实验中种属的选择( genus excerpt)

根据不同的实验目的,选择相应的种属。不同种属的动物对于同一疾病的刺激是有不同的反应程度的。例如在进行过敏反应或反应实验时,应豚鼠,而做发热、热原检定、解热药的实验时应选择家兔、犬。家免、大白鼠常用于研究、小白鼠则宜进行各类的实验研究。总之,在选用实验动物时,应尽可能选择其结构、功能和代谢特点接近于人类的动物。


判断动物是否健康,应掌握以下原则:


1.一般状态发育良好,反应灵活,食欲好,眼睛有神,不打喷嚏,鼻粘膜无分泌物等。

2.皮毛颜色动物皮毛要光洁柔软,医学实验外包,无脱毛、蓬乱和真菌的现象。

3.腹部呼吸动物腹部呼吸均匀,无膨大隆起的现象,无稀便无分泌物。

4.爪趾特征动物无咬伤、溃疡、结痂等情况。





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